Phos-tag(TM) Acrylamide Phos-tag丙烯酰胺

Phos-tag(TM) Acrylamide Phos-tag丙烯酰胺
货号:300-93523; 304-93521; 304-93526
包装:2mg;10mg;0.3ml
英文名:Phos-tag Acrylamide
品牌:Wako
使用Phos-tag(TM) SDS-PAGE和Phos-tag Acrylamide分离磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白。

Phos-tag 丙烯酰胺 Phos-tag Acrylamide
使用Phos-tag 进行磷酸化蛋白质的迁移率测定
– 使用丙烯酰胺标记的Phos-tag 进行磷酸蛋白亲和电泳层析
Phos-tag Acrylamide AAL-107
Phos-tag<sup>™</sup> Acrylamide
Phos-tag是由广岛大学高分子科学系开发的一种中性pH环境(生理pH)下的新型磷酸结合标记。Phos-tag SDS-PAGE这种电泳方法可以同时分析磷酸化蛋白异构体和配对二价锰的非磷酸化蛋白,是一种使用Pho-tag琼脂糖用于分离,纯化和富集磷酸化蛋白质的全新方法。该方法只需在常规的SDS-PAGE胶中添加Phos-tagAcrylamide (Phos-tag 丙烯酰胺)和锌离子或者锰离子即可实验。
Phos-tag磷酸化亲和电泳原理
Phos-tag<sup>™</sup>磷酸化亲和电泳原理
 Phos-tag  丙烯酰胺
Phos-tagTM SDS-PAGE 特点:
■ 不含放射性元素,非荧光物质
■ 不同位点磷酸化修饰的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来
■ 操作过程与常规 SDS-PAGE相类似
■ Phos-tag ™ 的结合特异性与氨基酸种类、序列无关
■ Phos-tag ™ SDS-PAGE实验后,可进行常规的免疫印迹或者质谱实验,也可进行 2 维电泳
■ 可区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白
■ Phos-tag ™ 母液可稳定保存至少 3 个月
Phos-tag ™应用
Phos-tag Acrylamide - 上海金畔生物,专业的Phos-tag产品供应商
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货号
厂商编号
产品名称
规格
304-93526
AAL-107S1
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107 5mM水溶液
0.3 ml (约0.9 mg)
300-93523
AAL-107M
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107
2 mg
304-93521
AAL-107
10 mg
Phos-tag™ Acrylamide在配胶中的使用浓度
货号
产品名称
使用浓度
20uM
50uM
100uM
304-93526
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107 5mM水溶液
约10块
约4块
约2块
300-93523
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107
约20块
约8块
约4块
304-93521
约100块
约40块
约20块

wako Phos-tag™ Acrylamide丙烯酰胺

Phos-tag™ Acrylamide
SDS-PAGE分离不同磷酸化水平的蛋白!
在不使用放射性同位素的情况下,利用Phos-tag™ SDS-PAGE即可分离不同条带中的磷酸化和非磷酸化蛋白。分离后的凝胶可用于Western blotting和质谱分析等后续实验。
Phos-tag™ SDS-PAGE操作简单,只需在常规SDS-PAGE胶中加入Phos-tag™ Acrylamide 和Mn2+或者Zn2+即可进行实验。在电泳过程中,磷酸化蛋白的磷酸基团与Phos-tag™中的二价金属离子相结合,降低其迁移速度,从而可区分磷酸化与非磷酸化蛋白。
上海金畔生物科技有限公司
服务热线:18301939375   QQ:3258089810    3259632176
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◆原理
◆优点、特色

  • 采用Phos-tag™ SDS-PAGE可轻松分离磷酸化蛋白

无任何放射性元素及化学标记!

  • 可检测不同磷酸化水平的磷酸化蛋白

无需任何磷酸化抗体!

  • 适用于内源性蛋白的磷酸化分析!

◆案例、应用
【使用Phos-tag™ SDS-PAGE的磷酸化/非磷酸化蛋白比较】
我推荐使用Phos-tag ™ ——东京大学研究院医学研究科 小川觉之
Phos-tag ™ 是专为研究磷酸化蛋白而新开发出来的试剂。此产品使用方便,不但可用于体外实验,还能定量分析体内蛋白的磷酸化水平。Phos-tag ™ SDS-PAGE 可用于常规电泳实验,无需购买特殊设备,性价比高。传统蛋白磷酸化的研究需要特异的磷酸化抗体、RI 等其它试剂,操作复杂,花费大,且放射性元素会有安全隐患,而Phos-tag ™ 的出现恰恰可以弥补这些缺点,为磷酸化蛋白研究提供新的方向。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白利用Phos-tag ™ SDS-PAGE 的分离效果图
Lane 1 为非磷酸化蛋白,Lane 2-5 为磷酸化蛋白,各蛋白因磷酸化状态不同而条带迁移率也有所不同。
磷酸化/ 非磷酸化蛋白的数量比、磷酸化程度、磷酸化蛋白的丰度等都可根据条带迁移和条带浓度求得。
【资料提供】
日本东京大学研究生院医学系研究科
【二维电泳中的应用:分析hnRNP K 磷酸化异构体】
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ™ SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
二维电泳
同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics , Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)理化学研究所RCAI 小原收
【EGF 刺激前后MAPK 磷酸化水平的变化】
常规SDS-PAGE 和Phos-tagTM SDS-PAGE 后迚行克疫印迹实验分析EGF 刺激的A431 细胞中MAPK 磷酸化水平。
摘自Kinoshita-Kikuta, E. et al., Mol.Cell. Proteomics. (2007)6: 356.

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
304-93526  Phos-tag Acrylamide AAL-107
5mM Aqueous Solution Phos-tag 丙烯酰胺5mM水溶液
0.3mL 蛋白研究
300-93523  Phos-tag Acrylamide AAL-107
Phos-tag 丙烯酰胺
2mg 蛋白研究
304-93521  Phos-tag Acrylamide AAL-107
Phos-tag 丙烯酰胺
10mg 蛋白研究
134-15302 Manganese(II) Chloride Tetrahydrate氯化锰四水合物 25g for Molecular Biology

 

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